報告基因法檢測促胰島素分泌肽融合蛋白生物學活性

作者:楊俊嶺 整理 來源:醫學論壇網 日期:16-05-26

  近期,北京市藥品檢驗所研究人員發表論文,旨在建立報告基因法檢測促胰島素分泌肽融合蛋白(Exendin-4-HSA,Byetalog)生物學活性。研究指出,報告基因法操作簡便,重複性和準確性都較高,有望作為替代方法應用於促胰島素分泌肽融合蛋白的生物學活性測定。該文發表在2016年第02期《藥物分析雜誌》上。

  將胰高血糖素樣肽-1受體(glucagon-likepeptide 1 receptor,GLP-1R)表達載體和c AMP反應元件(c AMP response element,CRE)報告基因載體共轉染CHO-K1細胞,經加壓篩選和單克隆分離培養獲得穩定的單克隆細胞株;使用藥物反應強的單克隆細胞株建立報告基因方法;對新建方法進行條件優化,並用優化的方法對促胰島素分泌肽融合蛋白原液和成品進行生物學活性測定。

  經加壓篩選和單克隆分離培養後獲得對Byetalog強反應性的細胞株CHOglpar/crec14;新建方法劑量反應曲線符合四參數方程,R~2大於0.99;對促胰島素分泌肽融合蛋白的原液和成品分別測定3次,RSD值均低於5.0%,回收率在70%~130%之間。

   相關鏈接:http://new.ywfxzz.cn/

  

關鍵字:促胰島素分泌肽融合蛋白,,轉基因細胞,,報告基因法,,CRE,,GLP-1R,,生物學活性測定,

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