日前，解放軍第三○九醫院器官移植中心泌尿一科、第二軍醫大學長征醫院器官移植中心、第二軍醫大學免疫研究所共同發表論文，旨在建立小鼠原代培養小鼠腎小管上皮細胞(TEC)體外模擬缺血再灌注(IR)的模型。研究指出，小鼠腎髒外側髓質經分離、消化後可獲得高純度的原代培養TEC；應用石蠟油可以成功建立小鼠TEC體外模擬IR的模型。該文章發表在2012年第33卷第7期《中華器官移植雜誌》上。

　　切取C57BL/6J小鼠腎髒外側髓質，用Ⅰ型膠原酶消化後進行原代培養，采用免疫組織化學法進行鑒定。將貼壁生長的TEC用石蠟油覆蓋模擬缺血過程，60 min後更換全培養基模擬再灌注過程。在更換培養基後不同時間點收集細胞，抽提RNA，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素1β(IL-1β)和IL-6 mRNA的表達；在再灌注後24 h收集細胞培養上清液，采用酶聯免疫吸附試驗檢測各細胞因子蛋白的表達。

　　結果顯示，經過原代培養的小鼠TEC呈上皮細胞特有的“鋪路石”狀，細胞胞漿內高表達細胞骨架蛋白18。與對照組相比，IR組TEC在更換培養基後TNF-α、IL-1β和IL-6的轉錄水平均明顯增高。TNF-α mRNA表達量在更換培養基後0.5h達峰，約為對照組的(24.45±6.51)倍(P＜0.01)，隨後逐漸下降；在更換培養基後IL-1β mRNA表達量呈逐漸上升的趨勢，更換培養基後6h約為對照組的(15.27±4.29)倍(P＜0.05)；IL-6 mRNA表達量在更換培養基後3h達峰，約為對照組的(11.19±4.55)倍(P＜0.01)。與對照組相比，IR組TEC在更換培養基後24 h，上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表達均明顯增高。