上海交通大學醫學院附屬新華醫院心胸外科。上海交通大學醫學院附屬新華醫院兒內科共同發表論文,旨在探討水通道蛋白-1(AQP1)慢病毒載體可否成功轉染心肌細胞,轉染成功的心肌細胞在體外循環結束後,不同時點AQP1表達變化及與心肌水腫的關係。研究指出,AQP1慢病毒載體可成功轉染心肌細胞,AQP1高表達的心肌組織在體外循環後不同時間點AQP1的表達和水腫程度變化趨勢不變,但均較空載體轉染組程度高。AQP1表達量與心肌水腫程度正相關。該文章發表在2012年第28卷第9期《中華胸心血管外科雜誌》上。
健康成年羊36隻,分為空載體組和AQP1慢病毒轉染組。根據羊AQP1mRNA全基因設計酶切引物,克隆到慢病毒表達載體中,與其它包裝載體共轉染293T細胞產生病毒載體並測定病毒滴度。體外循環期間將空載體或AQP1病毒懸液注射入左心室心肌組織,體外循環結束後不同時間點(2、6、12、24、48、72h)取材,每個時間點3隻。應用realtimePCR、WesternBlot、ELASE、流式細胞儀(FACS)和幹濕重法等檢測AQP1慢病毒載體是否成功轉染心肌細胞,成功轉染體外循環後不同時間點AQP1表達變化和心肌水腫程度。
結果顯示,成功構建AQP1慢病毒載體並轉染心肌細胞,體外循環後不同時間點AQP1表達變化趨勢和心肌水腫程度與空載體組心肌表達變化趨勢一致,但程度較高,差異有統計學意義(P<0.05)。