胰島素基因轉染的人臍帶間充質幹細胞與絲素蛋白支架構建組織工程脂肪的研究

作者:張靜 整理 來源:醫學論壇網 日期:12-12-12

  近日,蘭州軍區蘭州總醫院全軍燒傷整形外科中心唐軍、劉毅和徐斌等共同發表論文,旨在探討攜帶重組人胰島素基因慢病毒載體轉染的人臍帶間充質幹細細( human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)與絲素蛋白支架在體外構建組織工程化脂肪(tissue engineering adipose)的可行性。研究指出,轉染胰島素基因的hUCMSCs成脂分化能力明顯提高,且能有效地與絲素蛋白支架在體外構建組織工程化脂肪。該文章2012 年第18卷第04期《中華醫學美學美容雜誌》上。

  以最適感染複數(MOI)為10重組慢病毒pLenti6。3-insulin-IRES-EGFP轉染hUCMSCs組為實驗組(A組),EGFP基因轉染組為對照組(B組);將兩組細胞接種於絲素蛋白支架,觀察細胞在支架上的生長及黏附情況;爾後行細胞-支架複合物成脂誘導。四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測重組慢病毒轉染對hUCMSCs生長增殖的影響以及基因轉染後的hUCMSCs在絲素蛋白支架上的活性。

  細胞-支架複合物成脂誘導5~7 d後,見A組支架內脂肪樣細胞數量明顯多於B組,差異有顯著統計學意義(P=0.007,P<0.01);逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測顯示,A組hUCMSCs表達的成脂特異性基因PPARγ-2明顯高於B組。MTT法檢測結果顯示,轉染重組慢病毒的hUCMSCs與未轉染組各時間點吸光度A值比較,差異均無統計學意義(P=0.056,P>0.05)。細胞組與細胞支架組A值比較,差異無統計學意義(P=0.066,P>0.05)。

關鍵字:組織工程化脂肪,人臍帶間充質幹細胞,絲素蛋白,胰島素,基因轉染

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