日前,江蘇大學附屬金壇市人民醫院神經外科、南京醫科大學附屬第一醫院神經外科共同發表論文,旨在探討再程序化脂肪幹細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)體外定向神經分化的效率和機製。研究指出,再程序化ADSCs誘導後神經元分化的比例較單純ADSCs提高近99%,再程序化ADSCs定向分化神經元機製可能是通過上調Dll1蛋白水平,同時下調Mash1、Hes1蛋白水平,抑製notch信號通路,從而促進細胞的定向神經分化。該文章發表在2012年第28卷第12期《中華創傷雜誌》上。
體外培養大鼠ADSCs並純化、鑒定,將第3代ADSCs分為三組;未進行慢病毒介導基因轉染ADSCs組(空白組);不含神經元生成素-2(neurogenin-2,Ngn2)基因慢病毒空載體轉染ADSCs組(空病毒組);慢病毒載體介導Ngn2基因轉染ADSCs組(Ngn2組);各組細胞均用含細胞生長因子的誘導培養基誘導15 d。免疫熒光檢測各組細胞神經元特異性蛋白(NeuN)陽性表達以觀察神經元分化效率;Western blot檢測各組細胞Mash1、Hes1、Dll1蛋白表達水平的差異,探索分化機製。
結果顯示,誘導培養基誘導15 d後,Ngn2組、空病毒組、空白組陽性表達NeuN分別為90.12%、45.34%、40.26%,各組比較差異均有統計學意義(P<0.01)。Western blot結果顯示,Ngn2組Dll1蛋白表達水平明顯高於空病毒組和空白組(P<0.01),Mash1、Hes1蛋白表達水平明顯低於空病毒組和空白組(P<0.01);空病毒組和空白組Dll1、Mash1和Hes1蛋白表達差異均無統計學意義(P>0.05)。