聚乙二醇去細胞瓣複合支架聯合人主動脈瓣膜間質細胞體外構建組織工程心髒瓣膜

作者:陳小姣 整理 來源:醫學論壇網 日期:13-02-07

  日前,華中科技大學附屬協和醫院心外科的史峰、鄧誠和胡行健等人共同發表論文,旨在運用聚乙二醇(PEG)交聯豬去細胞瓣,共價接枝GRGDSPC多肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-絲氨酸-脯氨酸-半胱氨酸),並聯合人主動脈瓣膜間質細胞(HAVICs)體外構建組織工程心髒瓣膜。研究指出PEG交聯去細胞瓣可明顯改善瓣膜支架力學性能,GRGDSPC多肽接枝的PEG-去細胞瓣複合支架,可促進種子細胞的粘附,改善瓣膜支架生物學性能。該文章發表在2012年09期的《臨床心血管病雜誌》上。

  通過邁克爾加成反應,將去細胞瓣支架上引入的巰基與枝化狀PEG末端丙烯酰基共價結合,使PEG交聯去細胞瓣,並行生物力學檢測。再利用PEG-去細胞瓣支架上未飽和的丙烯酰基與GRGDSPC多肽末端半胱氨酸的巰基發生邁克爾加成反應,對PEG-去細胞瓣支架行GRGDSPC多肽共價修飾,免疫熒光測定GRGDSPC多肽修飾效果。在RGD-PEG-去細胞瓣複合支架上種植HAVICs,縫製於生物反應器內,體外構建心髒瓣膜。接種2、4、8h後,通過細胞計數觀察細胞粘附情況。體外培養10d後行形態學觀察和DNA含量測定。

  力學測試結果顯示,PEG-去細胞瓣支架的最大抗張強度較單純去細胞瓣支架明顯提高[(7.53±0.32)Mpa∶(5.65±0.28)Mpa],差異有統計學意義(P<0.05),與天然主動脈瓣的差異無統計學意義(P>0.05)。免疫熒光檢測顯示,GRGDSPC多肽可有效地與PEG-去細胞瓣共價接枝。不同時段細胞粘附計數及形態學觀察提示,RGD-PEG-去細胞瓣複合支架明顯促進HAVICs的粘附,並可在瓣膜表麵形成連續單細胞層。DNA含量測定提示,RGD-PEG-去細胞瓣複合支架DNA含量明顯增高(P<0.05)。

關鍵字:去細胞瓣,聚乙二醇,GRGDSPC多肽,生物反應器,粘附

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