近期,貴陽醫學院藥學院貴州省藥物製劑重點實驗室研究人員發表論文,旨在探討參芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)對過氧化氫(H2O2)誘導的H9c2細胞氧化損傷的保護作用及其機製。研究指出,參芎葡萄糖注射液能保護H9c2心肌細胞對抗H2O2誘導的氧化損傷,其作用機製可能與其提高細胞清除ROS能力和抑製細胞凋亡有關。該文發表在2016年第08期《中國實驗方劑學雜誌》上。
體外培養H9c2心肌細胞,用H2O2(300μmol·L-1)處理0.5 h,建立H9c2心肌細胞H2O2氧化損傷模型,SGI組:H9c2細胞用(100,200,400μmol·L-1)SGI處理6 h後,另設空白組與模型組,再用H2O2處理0.5 h。利用流式細胞術檢測細胞內活性氧(ROS)和線粒體膜電位(MMP);用MTS法檢測細胞存活率;用酶聯免疫吸附測定(ELISA)法檢測乳酸脫氫酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)和穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性;用蛋白質免疫印跡(Western blot)技術檢測凋亡相關基因B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相關X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)的表達情況。
結果顯示, 在300μmol·L-1H2O2作用細胞0.5 h的情況下,細胞存活率降低至50%左右,降低的程度合適,且實驗結果重複性好,因此後續實驗用該條件建立氧化損傷模型。與模型組比較,SGI預處理6 h能顯著升高細胞存活率(P<0.05,P<0.01),減少LDH的外漏和MDA的生成(P<0.05,P<0.01),顯著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P<0.01),明顯減少H9c2細胞內ROS含量(P<0.01),並使MMP丟失減少(P<0.01),Western blot表明,SGI能顯著上調Bcl-2的表達,下調Caspase-3的表達(P<0.05,P<0.01)。