B淋巴細胞在腫瘤免疫中的研究是新近熱點。在實體腫瘤中發現B細胞浸潤及其構成的三級淋巴結構(Tumor-associated tertiary lymphoid structures，TLS)與抗腫瘤免疫激活、免疫治療響應密切相關。但是， B細胞也通過腫瘤免疫微環境與免疫調節發揮促腫瘤免疫抑製效應，後者的研究存在較多空白。因此，剖析腫瘤浸潤B細胞的特性及其調節功能的獲得機製，才能全麵了解腫瘤相關B細胞，並建立相應的免疫幹預策略。

近日，複旦大學儲以微/劉榮花團隊在 Immunity 期刊發表了題為：Leucine-tRNA-synthase-2-expressing B cells contribute to colorectal cancer immunoevasion 的研究論文。

研究團隊利用單細胞技術分析了結直腸癌(Colorectal Cancer，CRC)不同階段的腫瘤浸潤B細胞，發現一群高表達亮氨酸tRNA合成酶2(LARS2)的B細胞新亞群——LARS B。這群 LARS B 不僅具有 TGF-β1 主導的調節性特征，而且具有亮氨酸營養偏好。因此，研究團隊從營養與代謝視角解析了腫瘤浸潤B細胞獲得調節功能的機製，並提出了通過限製亮氨酸飲食清除 LARS B 細胞、激活抗腫瘤免疫效應。

在這項研究中，研究團隊通過收集小鼠 CRC 局部組織，分選腫瘤浸潤 CD45+ 細胞進行單細胞測序，分析發現 LARS B 亞群獨立於 FOB、GCB 和 PC 亞群，以高表達 Lars2 為主要特征(圖1)。細胞表型上，LARS B 類似漿細胞前體細胞，表達漿細胞驅動基因 Prdm1，但抗體分泌能力較低，CD138 低表達，相反高表達抑製性分子 Tgfb1，與 Treg 細胞通訊密切。組織定位上，LARS B 散布於 TLS 以外的腫瘤間質，在正常組織以及骨髓、脾髒、外周血極少存在。

進一步，研究團隊通過收集臨床 CRC 患者的腫瘤組織、息肉和配對的正常組織及外周血，證實 LARS B 也存在於 CRC 患者。90例 CRC 患者的組織芯片染色結果顯示，組織內 LARS B 的富集與不良預後呈現正相關。

研究團隊分析了 LARS B 形成的原因和功能。他們發現，相比其他氨基酸，亮氨酸在腫瘤浸潤B細胞內呈現高富集現象;在化學誘導和原位腫瘤兩種 CRC 小鼠模型中，高亮氨酸飲食使腫瘤局部產生更多的 LARS B，促進腫瘤進展(圖2)。過繼轉輸 Lars2 缺失的B細胞至免疫缺陷小鼠(CD79a-/-)以及在B細胞中條件性敲除 Lars2(CD79a-Cre Lars2fl/fl)，腫瘤明顯減小，並伴隨著 TGF-β1 的分泌以及 Treg 的減少。LARS B 對 TGF-β1 依賴的調節性特征和對 Treg 形成的影響，也通過 LARS B 分選、T/B 細胞共孵育以及 Tgfb1 條件性敲除小鼠得到了驗證。

在機製研究中，研究團隊發現 LARS B 的核心基因 LARS2 主要定位在線粒體，負責線粒體基因翻譯，包括線粒體呼吸鏈複合體I-V。相較於瘤內的其他B細胞亞群，LARS B 的線粒體代謝增強，特別是 NAD+ 的再生，而 NAD+ 依賴的去乙酰化酶 SIRT1 通過去乙酰化轉錄因子 PAX5，使其與 Tgfb1 啟動子區的結合能力增強，促進了 Tgfb1 轉錄，是 LARS B 獲得調節功能的重要機製。

基於 LARS B 的亮氨酸依賴性特點，研究團隊提出了一種安全有效的亮氨酸節律飲食方案(7天為一個周期：4天正常飲食，3天亮氨酸缺失飲食)，該飲食方案顯著抑製 LARS B 細胞介導的結直腸癌免疫逃逸，減緩了腫瘤進展(圖3)。這個氨基酸節律飲食 ，對臨床腸癌的防治和患者的個人飲食管理提供應用潛能。

複旦大學基礎醫學院免疫學係的博士生王誌強、中山醫院內鏡中心主治醫師林生力以及肝外科博士後陸舟為該論文的共同第一作者，複旦大學基礎醫學院及生物醫學研究院儲以微教授和生物醫學研究院青年研究員劉榮花為該論文的共同通訊作者。