日前,三峽大學醫學院三峽大學第一臨床醫學院眼科、三峽大學葛洲壩中心醫院眼科、宜昌市中心人民醫院眼科的研究人員共同發表文章,旨在探討核心蛋白多糖( decorin)對兔LECs增生的抑製作用及其劑量-效應與時間-效應的關係。研究表明,Decorin可以抑製LECs的增生,也可以誘導LECs凋亡,其效應呈明顯的劑量和時間依賴性,有望成為最具潛力的防治PCO的藥物之一。該文章發表在《中華實驗眼科雜誌》2012 年第30卷第1期上。
該研究將兔LECs細胞株進行培養和傳代,將處於指數生長期的細胞以8×106個/L密度接種於96孔板,將0.1、1.0、10.0 mg/Ldecorin分別加入培養基中培養24、48、72 h,加入體積分數0.1% DMSO培養的細胞為陽性對照組,常規培養基培養的細胞為空白對照組。MTT比色法分別測定不同質量濃度的decorin作用於LECs不同時間後的細胞生長抑製率;采用流式細胞技術測定各組細胞的細胞周期,用ELISA法檢測各組培養液上清中TGF-β的水平,逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法測定TGF-βmRNA在LECs中的表達,免疫細胞化學法觀察α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達。
結果顯示,ELISA檢測結果表明,各組培養基上清液中TGF-β表達量的差異有統計學意義(F=39.24,P=0.03),不同質量濃度組TGF-β水平均明顯低於空白對照組,差異有統計學意義(P<0.01),1.0 mg/L、10.0 mg/L decorin組TGF-β水平均明顯低於0.1 mg/L decorin組(P<0.05)。MTT比色法結果顯示,≥1.0 mg/L decorin組LECs增生的抑製率明顯高於空白對照組,各質量濃度decorin組藥物作用48 h和72 h後LECs增生的抑製率明顯高於24 h的值,藥物作用72 h後LECs增生的抑製率明顯高於48 h的值,差異均有統計學意義(P<0.05),各質量濃度decorin組G0/G1期LECs所占比例均較空白對照組明顯增加,差異均有統計學意義(P<0.05)。RT-PCR檢測顯示,TGF-β mRNA的表達隨著decorin質量濃度的升高而降低。免疫組織化學染色表明,10.0 mg/L decorin組α-SMA在LECs中的表達明顯弱於空白對照組。