一種連續動態直接觀察皮膚創口感染的小鼠模型

作者:耿一博 整理 來源:醫學論壇網 日期:13-03-11

  日前,上海交通大學醫學院附屬第三人民醫院燒傷整形科石有振、王瑩、顧釧等共同發表論文,旨在建立一種穩定、可連續動態直接觀察皮膚創口感染動物模型。研究指出,小鼠皮膚全層切割傷創口接種50μl含1×108 CFU/ml可發光MRSA菌株懸液,可直接實時動態連續觀測創口感染的發生與發展,該感染模型易於製作,穩定和重複性高。該文章發表在2012年第28卷第9期《中華創傷雜誌》上。

  製作小鼠背部全層皮膚切割傷模型,即刻予以皮下縫合後按隨機數字表法分為四組:A組小鼠接種50μl無菌PBS液(PBS對照組),B、C、D組(感染組)小鼠分別接種50μl含1×106、1×108和1×1010菌落形成單位(colony forming unit,CFU)/ml可發光耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin- resistant staphylococcus aureus,MRSA)菌株懸液。觀察接種後每組小鼠的飲食活動,並記錄1,2,3,5,7,9,11,14 d的平均體重及其死亡率;接種後各時相點采用以電荷耦合器件(charge - couplddevice,CCD)為基礎的成像係統記錄小鼠創口的熒光素發光強度;接種後24 h切取創口局部組織HE染色,觀察各組小鼠創口炎症反應情況;記錄每組小鼠創口愈合時間。

  結果顯示,(1)平均體重:A、B組小鼠無明顯波動;C組逐漸減輕,第3天後逐漸增加,第14天增至接種前水平;D組逐漸減輕直至死亡。(2)死亡率:A、B組為零,C組第14天小鼠死亡率為10%,D組小鼠至接種後第3天死亡率為100%。(3)創口熒光素發光強度:A、B組自接種當天起均逐漸減弱,分別至第5,7天接近完全消失;C組自接種當天起至第14天無明顯增強和減弱跡象;D組自接種當天起逐漸增強,且範圍逐漸擴大直至死亡。(4)接種後24 h HE染色:四組小鼠創口均有炎症細胞浸潤,C、D組浸潤更明顯。(5)創口愈合時間:A、B組分別於接種後第5,7天愈合;C組至第14天仍未愈合,且切口長度及範圍未見明顯擴大與減小;D組創口範圍自接種當天起逐漸擴大直至死亡。

關鍵字:模型,動物,感染,耐甲氧西林金葡菌

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