在人體內,血小板膜糖蛋白多態性具有免疫原性,是引起新生兒同種免疫性血小板減少症等疾病的重要臨床免疫反應的原因。來源於攜帶罕見多態性個體的血小板通常難以獲得,使得診斷性檢測和輸注匹配的血小板具有挑戰性。I類HLA抗體經常出現在母體血清中,對血小板反應性同種抗體的檢測帶來額外的幹擾。檢測人血小板抗原(HPA) 3和9的同種異體抗體尤其具有挑戰性,部分原因是由於位於多態氨基酸附近的細胞類型特異性聚糖的存在,它們共同形成了同種表位。
為了克服這些限製,研究人員生成了一係列I型HLA陰性的、O型血的、誘導多能幹細胞(iPSCs),並對其進行基因編輯,使其內源性的HPA-3a同種抗原表位依次轉變成HPA-3b、HPA-9a轉化為HPA-9b。並使這些細胞分化成CD41+/CD42b+人巨核細胞(MKs),然後通過流式細胞儀檢測可疑的抗HPA-3和HPA-9的異源抗血清,進而發現HPA-3a陽性的MKs可與HPA-3a患者的血清發生特異性反應,而HPA-3b MKs則不與HPA-3a患者的血清發生反應,而是與HPA-3b患者的血清發生特異性反應。
重要的是,表達HPA-9b的MKs與疑似抗HPA-9b的患者樣本發生特異性反應,而且傳統技術並不能檢測出來。
在細胞表麵表達完整的純合糖蛋白同種異體抗原的特化iPSC來源的人巨核細胞,可大大提高對臨床重要的、罕見的HPA特異性的同種異體抗體的檢測能力。