目的:腺苷通過多種途徑對缺血/再灌注的心肌發揮保護作用。動物實驗證明腺苷介導的心肌保護效應具有劑量依賴性,而腺苷還會引起血壓降低,心率減慢,傳導阻滯等副作用。本實驗比較不同濃度腺苷對心肌的保護作用效果的優劣,旨在尋找最佳腺苷濃度,為腺苷在臨床中的使用提供理論依據。
方法:將體重240-280 g 的24隻健康清潔級雄性SD大鼠,隨機分配到4組,每組6隻,分別以不同濃度的腺苷停跳液處理,A組(對照組):0 mmol/L ,B組:0.1 mmol/L, C組:0.2 mmol/L , D組:0.3 mmol/L。各小鼠腹腔注射3%戊巴比妥(3 ml/kg),300 u肝素鈉(4 ml/kg),麻醉後開腹,開胸取心,立即置於4℃K-H液中,隨即迅速行主動脈逆行插管並與Langendorff裝置相通,保持自搏心率。以37±0.5℃,K-H液混合1.5 L/min流量的95%O2+5%CO2,持續灌注心髒,調節灌注液麵高度以控製灌注壓於54.75 mmHg水平,平衡10min。經左心耳切口向左心室置入1個充水球囊,接換能器測心功能。平衡10min後收集冠脈流出液於-20℃冷凍。經主動脈根部側管以44.25 mmHg(5.9kpa)壓力灌注1℃冷心肌停跳液,同時心表冷生理鹽水降溫(離體心髒置於15℃水浴)直至複灌,停搏期間,每20 min按5 ml/kg複灌相同心肌保護液一次,每次灌注2min,停搏60分鍾。開放主動脈插管,恢複逆灌15 min,觀察40 min。收集複灌後5、15、25、40 min的冠脈流出液,記錄各時間點的血流動力學指標。同時測量所收集的冠脈流出液中的磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脫氫酶(LDH)含量。試驗結束後取心肌組織測量跟凋相關的caspase 3活性以及用TUNEL法檢測細胞凋亡。
結果:與對照組相比,B、C、D各組心肌損傷較小,相關檢測指標均有統計學差異(P<0.05)。與B組、C組相比,D組心肌保護作用較強,但差異並無統計學意義(P>0.05)。此外,與對照組相比,B、C、D各組並沒出現血壓降低,心率減慢等不良反應。
結論:含有腺苷的停跳液確實對心肌細胞起著保護作用,但腺苷濃度跨度較小的停跳液的心肌保護作用卻沒有明顯差異。腺苷濃度在0.3 mmol/L以下,未發現有心血管不良反應。