近期，皖南醫學院弋磯山醫院創傷骨科研究人員發表論文，旨在探討不同時間點應用低劑量甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）對大鼠脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）後神經細胞凋亡的作用，探討其潛在的神經保護機製與合適的給藥時機。研究指出，低劑量MTX能夠通過抑製神經細胞凋亡有效阻止SCI的繼發性損傷；預防性應用MTX效果優於單純治療性應用。該文發表在2016年第04期《中國修複重建外科雜誌》上。
取成年雄性SD大鼠120隻，體質量247～286 g，隨機分為4組（n=30），分別為假手術組（A組）、對照組（B組）、MTX治療組（C組）和MTX預防組（D組）。A組僅行椎板切除，B、C、D組采用改良Allen法製備SCI模型；C組於術後1、6、12、18、24 h，D組於術前30 min及術後6、12、18、24 h，經尾靜脈注射MTX（0.5 mg/kg）；A、B組於術後1、6、12、18、24 h注射等量生理鹽水。術後觀察大鼠一般情況，於1、3、7、14、21 d采用BBB評分進行神經功能評估；取材行組織學觀察脊髓形態學變化，免疫組織化學染色觀察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表達，TUNEL標記觀察細胞凋亡水平。
結果顯示， B、C、D組實驗過程中共死亡10隻大鼠，最終各組納入25隻大鼠進行觀察。各時間點A組BBB評分均高於B、C、D組（P<0.05），從3 d開始C、D組評分明顯高於B組（P<0.05）；D組從3 d開始均高於C組，除21 d（P>0.05）外，其餘各時間點比較差異均有統計學意義（P<0.05）。組織學觀察示，A組術後各時間點脊髓組織為正常結構；D組SCI程度輕於B、C組，C組輕於B組；從14 d開始，B、C、D組病變範圍基本固定。各時間點B、C、D組Caspase-3及TUNEL陽性細胞數均顯著多於A組，B組多於C、D組，比較差異有統計學意義（P<0.05）；C組Caspase-3陽性細胞數均多於D組，其中3、7、14 d比較差異有統計學意義（P<0.05），而TUNEL陽性細胞數僅3、7 d顯著多於D組（P<0.05）。術後1、3、7、14、21 d，B、C、D組組內Caspase-3、TUNEL陽性細胞數均成正相關（P<0.05）。
