大鼠軟骨非全層損傷模型的建立及活化細胞與整合素β1表達關係的研究

作者:楊俊嶺 整理 來源:醫學論壇網 日期:16-05-19

  近期,南京醫科大學附屬南京醫院骨科研究人員發表論文,旨在探討大鼠軟骨非全層損傷模型的製備及術後細胞變化及細胞活化與整合素β1表達的關係。研究指出,通過劃痕能夠建立大鼠軟骨非全層損傷模型,且損傷無法完全修複。劃痕造成的軟骨損傷周圍存在活化細胞聚集現象,細胞的活化與軟骨基質改變關係不大;這些活化細胞處於增殖活躍狀態,可同時表達CD105和整合素β1。該文發表在2016年第04期《中國修複重建外科雜誌》上。

  10周齡SD雄性大鼠45隻,體質量300400 g,隨機分為手術組、假手術組和對照組,每組15隻。手術組采用劃痕法製造軟骨非全層損傷模型;假手術組打開膝關節囊後直接縫合;對照組不行手術。術後1、7、14 d各組分別處死5隻大鼠,取材行大體觀察;並行HE、番紅O組織學染色,評估並比較各組HE染色改良組織學評分及番紅O染色灰度值;行Brd U、CD105免疫熒光染色和CD105/整合素β1雙標記染色,采用標準雙盲法計數並比較各組各時間點CD105陽性細胞數。

  結果顯示, 大體觀察示手術組劃痕周圍軟骨欠光滑,非透明,有軟骨軟化、纖維化改變,且隨造模時間延長逐漸加重;假手術組和對照組軟骨呈白色透明狀,無軟化、纖維化改變。HE染色示手術組在劃痕周圍細胞數增多,大小不等,排列分布不均;假手術組和對照組細胞大小均一,染色均勻,排列有序。手術組術後各時間點HE染色改良組織學評分均顯著高於假手術組及對照組(P<0.05),各組組內各時間點間比較差異均無統計學意義(P>0.05)。番紅O染色示手術組各時間點染色欠均勻,劃痕周圍區域著色較淺;假手術組和對照組各時間點染色均勻,無失染。術後各時間點各組間比較以及各組內各時間點間比較番紅O染色灰度值,差異均無統計學意義(P>0.05)。Brd U免疫熒光染色示手術組劃痕周圍細胞排列紊亂,分布不均;假手術組和對照組細胞排列分布均勻,無聚集現象。CD105免疫熒光染色示手術組劃痕周圍有較多陽性細胞聚集,細胞大小不一、分布不均;假手術組和對照組軟骨層見少數陽性細胞,分布均勻。手術組術後各時間點CD105陽性細胞數均顯著多於假手術組和對照組(P<0.05);手術組內隨時間延長CD105陽性細胞數逐漸增多,各時間點間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。CD105/整合素β1雙熒光標記染色示手術組劃痕周圍有雙標陽性細胞聚集,假手術組和對照組各時間點均未觀察到雙標陽性細胞。

   相關鏈接:http://med.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgxfcjwkzz

關鍵字:軟骨非全層損傷,,軟骨前體細胞,,CD105,,BrdU,,整合素β1,,大鼠,

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